在生命科學(xué)研究、生物制藥開發(fā)及細胞治療等前沿領(lǐng)域，準(zhǔn)確的細胞計數(shù) 是實驗成功的關(guān)鍵基石。賽默飛世爾科技旗下的Countess 3自動細胞計數(shù)儀 ，以其便捷操作、快速分析 和精準(zhǔn)結(jié)果 ，已成為眾多實驗室提升效率的工具。為了幫助您充分發(fā)揮Countess 3的性能優(yōu)勢，確保每一次計數(shù)結(jié)果都穩(wěn)定可靠 ，我們總結(jié)了在使用過程中需要特別注意的關(guān)鍵事項，助您輕松駕馭實驗流程。

一、 樣本制備階段：奠定精準(zhǔn)計數(shù)基礎(chǔ)

細胞懸液均一性是核心：

均勻混勻： 在取樣前，務(wù)必充分混勻您的細胞懸液。劇烈的渦旋振蕩或反復(fù)吹打（避免產(chǎn)生過多氣泡）是確保細胞均勻分布 的關(guān)鍵。不均勻的樣本會導(dǎo)致計數(shù)區(qū)域細胞密度差異大，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性 。

避免結(jié)團： 確保細胞處于良好的單細胞懸液 狀態(tài)。明顯的細胞團塊會影響儀器的自動識別精度 。對于容易結(jié)團的細胞，可考慮使用溫和的解離試劑 或優(yōu)化制備流程。

排除氣泡干擾： 移液或混勻時盡量避免引入氣泡。氣泡在計數(shù)腔中會被誤識別為細胞，導(dǎo)致計數(shù)結(jié)果虛高 。

選擇匹配的計數(shù)板/玻片：

專用耗材： Countess 3設(shè)計使用特定的一次性計數(shù)板（Countess Cell Counting Chamber Slides） 。務(wù)必使用原廠或認證兼容的耗材，確保其光學(xué)特性和腔體尺寸與儀器的自動對焦 和成像系統(tǒng) 匹配，這是獲得清晰圖像 和精確結(jié)果 的前提。

正確加樣： 按照說明將適量（通常10μL）的細胞懸液準(zhǔn)確加入到計數(shù)板的加樣孔中。避免加樣不足或溢出，影響成像質(zhì)量。

染料選擇與使用（如適用）：

臺盼藍染色： 用于活/死細胞鑒別 時，需確保臺盼藍染料與細胞充分混合，并在推薦時間內(nèi)（通常1-2分鐘）完成計數(shù)，避免染色時間過長影響細胞狀態(tài)或死細胞比例。

熒光染色： 若使用Countess 3 FL型號的雙熒光通道 進行更復(fù)雜的分析（如特定細胞群計數(shù)、轉(zhuǎn)染效率分析），需嚴(yán)格按照試劑說明進行染色、避光孵育，并確保染料與儀器兼容。

二、 儀器操作階段：確保流程順暢無誤

儀器啟動與環(huán)境準(zhǔn)備：

穩(wěn)定放置： 將Countess 3放置在穩(wěn)定、水平的臺面 上，避免震動影響自動對焦和成像清晰度。

清潔維護： 定期使用柔軟、無絨的干布 清潔儀器的藍色載物臺表面 和光學(xué)窗口 （避免使用有機溶劑或研磨劑）。保持光學(xué)部件清潔是獲取高質(zhì)量圖像 的基礎(chǔ)。

開機預(yù)熱（如需要）： 遵循說明書建議，部分情況下短暫開機預(yù)熱有助于系統(tǒng)穩(wěn)定。

軟件設(shè)置與參數(shù)優(yōu)化：

選擇正確應(yīng)用： Countess 3內(nèi)置多種預(yù)設(shè)應(yīng)用（如哺乳動物細胞、酵母、臺盼藍計數(shù)、熒光計數(shù)等）。根據(jù)您的樣本類型準(zhǔn)確選擇對應(yīng)的應(yīng)用，軟件會自動調(diào)用優(yōu)化的分析算法 和參數(shù)設(shè)置 。

自定義設(shè)置（進階）： 對于特殊樣本或特定需求，可進入高級設(shè)置微調(diào)細胞大小范圍、靈敏度、對比度 等參數(shù)，但建議在熟悉儀器性能后進行，或參考技術(shù)資料。

聚焦是關(guān)鍵： Countess 3的智能自動對焦 功能強大。確保計數(shù)板正確放置后，讓儀器自動完成對焦。如果自動對焦遇到困難（如樣本非常稀或濃），可嘗試手動微調(diào)（若支持）或檢查樣本/計數(shù)板。

樣本加載與運行：

輕柔插入： 將加好樣的計數(shù)板平穩(wěn)、輕柔 地滑入儀器插槽，避免劇烈動作導(dǎo)致樣本移位或產(chǎn)生氣泡。

啟動分析： 在軟件界面確認設(shè)置后，點擊計數(shù)按鈕。Countess 3會在數(shù)秒內(nèi) 完成快速成像 和智能分析 。

三、 結(jié)果解讀與后續(xù)維護：

結(jié)果判讀與驗證：

查看圖像： 務(wù)必查看分析后的細胞圖像 。檢查圖像是否清晰，細胞邊界是否分明，自動識別的標(biāo)記（綠框活細胞，紅框死細胞等）是否準(zhǔn)確覆蓋目標(biāo)細胞。這是判斷計數(shù)結(jié)果可信度 的重要步驟。

關(guān)注關(guān)鍵數(shù)據(jù)： Countess 3會提供總細胞濃度、活細胞濃度、存活率、平均細胞直徑 等結(jié)果。理解這些參數(shù)的含義及其對您實驗的意義。

異常結(jié)果處理： 如果結(jié)果異常（如存活率異常高/低、濃度與預(yù)期不符），首先回顧上述注意事項（樣本混勻、染色、參數(shù)設(shè)置等），必要時重復(fù)實驗。對照手工計數(shù) （如血球計數(shù)板）有助于在初期驗證儀器準(zhǔn)確性。

數(shù)據(jù)管理與導(dǎo)出：

保存結(jié)果： Countess 3軟件支持將帶圖像的分析結(jié)果保存為報告或?qū)С鰯?shù)據(jù) （如CSV格式），方便記錄、追溯和分析。

遵守規(guī)范： 遵循實驗室的數(shù)據(jù)管理和記錄保存規(guī)范。

儀器保養(yǎng)與耗材管理：

定期清潔： 如前述，保持光學(xué)部件和載物臺清潔。

妥善存放： 不使用儀器時，可拔掉電源或用防塵罩遮蓋。

耗材儲備： 確保有充足的一次性計數(shù)板 庫存，避免實驗中斷。妥善儲存耗材（避免高溫高濕）。

選擇Countess 3，選擇高效精準(zhǔn)的細胞分析體驗

通過關(guān)注以上關(guān)鍵注意事項，您可以大程度地保障賽默飛Countess 3自動細胞計數(shù)儀的性能表現(xiàn) 和結(jié)果可靠性 。其直觀的用戶界面 、快速的分析速度 和智能的算法 ，結(jié)合您規(guī)范的操作，將顯著提升實驗室的細胞計數(shù)效率 ，為下游實驗提供堅實的數(shù)據(jù)支撐。